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　　中國科學(xué)院西雙版納熱帶植物園民族藥研究組博士研究生范青飛在導(dǎo)師宋啟示研究員指導(dǎo)下，并與伊利諾伊大學(xué)芝加哥分校的Dr.Guido FrankPauli研究組合作，利用逆流色譜聯(lián)用LC-MS技術(shù)開發(fā)出一新的天然微量活性成分富集分析方法。為新的天然微量活性成分發(fā)掘提供了一種新的思路。 

　　Dr.Pauli在對高等植物中研究發(fā)現(xiàn)，在高等植物Juglansregia，Adonis aleppica中有與動物甾體類激素相同的化合物。根據(jù)之前文獻(xiàn)報(bào)道我們很有可能在Vitex屬中找到類似甾體類化合物。之所以前面無法檢測到，是因?yàn)槠浜刻停瑹o法達(dá)到儀器的檢測限。所以我們首先就是利用高速逆流色譜將這些甾體類化合物進(jìn)行富集，然后進(jìn)行檢測。 

　　一逆流色譜方法學(xué)建立 

　　我們以14個動物激素類化合物作為目標(biāo)化合物，做成混合物，并按照極性大小對這14個化合物進(jìn)行了編號（Fig.1）。我們應(yīng)用薄層色譜“Guess”method聯(lián)合HPLC分配實(shí)驗(yàn)選擇出了合適的溶劑體系(Fig.2)，并通過不同的溶劑系統(tǒng)來利用HSCCC對目標(biāo)區(qū)段進(jìn)行“切割”。首先通過ChMWat +2溶劑系統(tǒng)將這14個化合物均壓縮到0<K<1,從而去除K>1的大極性化合物，然后通過HEMWat-5溶劑系統(tǒng)將這14個化合物均壓縮到0<K<1，從而去除比目標(biāo)化合物極性更低的化合物。從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)化合物的終極富集。 

　　二實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 

　　將2g的Vitex的甲醇提取物溶于水，先用氯仿萃取目標(biāo)化合物，然后將氯仿萃取部位溶解于ChMwat+2雙相溶劑系統(tǒng)中，用下相多次萃取，再用HEMWat-5溶劑系統(tǒng)，在HSCCC上劃段，選取0<K<1的部位，進(jìn)行LC-MS分析以驗(yàn)證假設(shè)。經(jīng)LC-MS驗(yàn)證，在我們富集的區(qū)段，確實(shí)檢測到2個哺乳類類固醇激素化合物。 

　　相關(guān)結(jié)果以Countercurrent separation assisted identification of two mammalian steroid hormones inVitex negundo為題，發(fā)表在著名的分離化學(xué)雜志Journal of Chromatography A上。