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      中藥材“骨碎補(bǔ)”的DNA分子鑒定研究取得突破

      發(fā)布時間:2019-09-27
      來源:科技外事處

        “骨碎補(bǔ)”是我國傳統(tǒng)的中藥材,用于治療骨折、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)增生等與骨相關(guān)的疾病。《中華人民共和國藥典》記載的“骨碎補(bǔ)”為槲蕨(Drynaria roosii Nakaike)的干燥根狀莖。由于大量不同物種干燥根狀莖的形態(tài)相似,目前藥材市場上存在大量的混偽品,傳統(tǒng)的鑒定方法準(zhǔn)確度和效率均較低,導(dǎo)致“骨碎補(bǔ)”的用藥存在一定的安全和效率問題。 

        基于DNA分子的鑒定方法是最近發(fā)展起來的快速、準(zhǔn)確的技術(shù)手段。鑒于“骨碎補(bǔ)”及相關(guān)物種的DNA分子信息較少,傳統(tǒng)分子標(biāo)記和DNA條形碼技術(shù)存在一定的局限,版納植物園藥用植物栽培技術(shù)研究組和昆明植物研究所科研人員合作,以槲蕨(D. roosii Nakaike),中華槲蕨(D. sinica Diels),團(tuán)葉槲蕨(D. bonii Christ),川滇槲蕨(D. delavayi Christ),櫟葉槲蕨(D. quercifolia (L.) J. Sm.),石蓮姜槲蕨(D. propinqua (Wall.) J. Sm.),和崖姜(Pseudodrynaria coronans (Wall. ex Mett.) Ching7種(共21個樣)市場上常用做“骨碎補(bǔ)”的蕨類為研究對象,對這21個樣本進(jìn)行葉綠體基因組測序組裝(圖1),基于葉綠體基因組ML樹顯示,葉綠體基因組可以作為超級條形碼(super-barcoding)區(qū)分槲蕨和其它6種混偽品;通過比對分析發(fā)現(xiàn)葉綠體基因組上存在多個堿基多態(tài)性較高的片段,通過設(shè)計通用引物,獲得可以作為DNA條形碼鑒別“骨碎補(bǔ)”rbcL基因片段;進(jìn)一步分析葉綠體基因組發(fā)現(xiàn),槲蕨的葉綠體基因組上存在一些特異性的堿基插入/缺失位點區(qū)域,這些片段可用于開發(fā)特定序列擴(kuò)增區(qū)域(sequence characterized amplified regions, SCAR)標(biāo)記。通過設(shè)計基于槲蕨葉綠體基因組的特異性引物,運(yùn)用PCR方法篩選得到trnS-psb30rbcL-accDndhB-trnR三個SCAR標(biāo)記SCAR標(biāo)記只需通過PCR擴(kuò)增和瓊脂糖凝膠電流即可實現(xiàn)“骨碎補(bǔ)”準(zhǔn)確高效的鑒定。本研究為“骨碎補(bǔ)”的鑒定提供了快速、便捷、有效的方法,為中藥材DNA分子鑒定方法的研究提供了參考。 

        該研究成果以Authentication of traditional Chinese medicinal herb “Gusuibu” by DNA-based molecular methods為題,在線發(fā)表于國際權(quán)威學(xué)術(shù)期刊Industrial Crops and Products。碩士研究生沈宗芳為第一作者,昆明植物研究所楊俊波和版納植物園田波為共同通訊作者。

      1 七種蕨類植物葉綠體基因組結(jié)構(gòu)圖

      本文作者:沈宗芳、田波

      責(zé)任編輯:張維靜_151c53
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